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在培養(yǎng)細(xì)胞的過(guò)程中，換液是一項(xiàng)非常常規(guī)操作，它主要是為了清除細(xì)胞在生長(zhǎng)過(guò)程中產(chǎn)生的各種代謝廢物，補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)。那么，如何更換細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的溶液呢？

T75細(xì)胞培養(yǎng)瓶

準(zhǔn)備工作：裝有75%醫(yī)用消毒酒精的酒精噴壺、PBS緩沖液、含血清培養(yǎng)基、巴氏吸管、移液器、廢液缸。

具體步驟：

1、將器材放入超凈臺(tái)，打開(kāi)紫外照射滅菌，若是培養(yǎng)的細(xì)胞對(duì)溫度比較敏感，可以將含血清的培養(yǎng)基瓶放入37℃的水浴箱使得培養(yǎng)基溫度在37℃，再轉(zhuǎn)移到超凈臺(tái)紫外滅菌。另外，細(xì)胞培養(yǎng)間也需要紫外照射半小時(shí)左右。

血清培養(yǎng)基瓶

2、從培養(yǎng)箱取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用酒精噴壺在瓶子表面噴灑75%酒精消毒，轉(zhuǎn)移到超凈臺(tái)，打開(kāi)蓋子，輕輕吸出舊的培養(yǎng)液，可用移液器加入新鮮含血清培養(yǎng)基，注意一定不要從細(xì)胞貼壁面加入培養(yǎng)基，應(yīng)從側(cè)壁加，動(dòng)作輕柔，以免沖落細(xì)胞。

3、加好培養(yǎng)基后，蓋上蓋子，在瓶子上做標(biāo)記，注明換液時(shí)間，細(xì)胞種類，操作人員等信息。

T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4、放入培養(yǎng)箱之前應(yīng)再次用酒精噴一噴瓶子表面，然后應(yīng)記得整理操作臺(tái)，用酒精擦拭超凈臺(tái)臺(tái)面，清理廢液和垃圾。

在進(jìn)行換液操作時(shí)，全程注意無(wú)菌，操作人員要穿好滅菌服，戴好滅菌手套和口罩，手接觸到細(xì)胞培養(yǎng)瓶瓶口時(shí)一定要小心，避免造成污染。