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細胞工廠是貼壁細胞培養(yǎng)經(jīng)常會用到的一種細胞培養(yǎng)耗材，在實驗過程中我們要實時掌握細胞的生長狀態(tài)，根據(jù)具體情況做出相關(guān)調(diào)整。可以通過MTT法對細胞的活性進行檢測，從而確定細胞生長情況。

10層細胞工廠

MTT法又稱MTT比色法，是一種檢測細胞存活和生長的方法。其檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結(jié)晶甲臜并沉積在細胞中，而死細胞無此功能。二甲基亞砜（DMSO）能溶解細胞中的甲臜，用酶聯(lián)免疫檢測儀在570nm波長處測定其光吸收值，可間接反映活細胞數(shù)量。在一定細胞數(shù)范圍內(nèi)，MTT結(jié)晶形成的量與細胞數(shù)成正比。該方法已廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測、大規(guī)模的抗腫瘤藥物篩選、細胞毒性試驗以及腫瘤放射敏感性測定等。它的特點是靈敏度高、經(jīng)濟。

40層細胞工廠

在檢測細胞工廠內(nèi)細胞的活性之前，非常重要的一個步驟便是配制MTT。通常，此法中的MTT濃度為5mg/ml。因此，可以稱取MTT 0.5克，溶于100 ml的磷酸緩沖液（PBS）或無酚紅的培養(yǎng)基中，用0.22μm濾膜過濾以除去溶液里的細菌，放4℃ 避光保存即可。在配制和保存的過程中，容器盡量用鋁箔紙包住。

細胞培養(yǎng)瓶

在利用MTT法測定細胞工廠內(nèi)的細胞活性時要注意，MTT有致癌性，用的時候小心。這種方法只能用來檢測細胞相對數(shù)和相對活力，但不能測定細胞絕對數(shù)。在用酶標儀檢測結(jié)果的時候，為了保證實驗結(jié)果的線性，MTT 吸光度盡量在0-0.7 范圍內(nèi)。