在培養(yǎng)細胞時,細胞培養(yǎng)方瓶是用量比較多的一種細胞耗材。培養(yǎng)細胞是一項非常嚴謹?shù)墓ぷ鳎枰m宜的條件才能得以更好的生長。生長到一定程度好就涉及的細胞的收獲,那么,如何更好的消化瓶子內的細胞呢,可以遵循以下四項步驟:
1、第一步:倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍,這樣做的目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉。
2、第二步:加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍,這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍,兩次所得懸液混合傳入新的細胞培養(yǎng)瓶。
3、第三步:吸干凈瓶內剩余液體,加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍,吸掉棄之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察,待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸棄胰酶,加入新培養(yǎng)基開始吹打,吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。
4、第四步:用新的胰酶加進瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。繼續(xù)鏡下觀察,待剩余細胞間隙明顯,細胞獨立開來的時候,吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基吹打,懸液傳入新瓶培養(yǎng)。
通過以上操作,從細胞培養(yǎng)方瓶內消化下來的細胞質量更好,在進行后期的傳代過程中也會有更好的生長狀態(tài)。
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