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細(xì)胞培養(yǎng)瓶是一種方形的細(xì)胞培養(yǎng)耗材，主要用于各種貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。貼壁細(xì)胞需要附著在支持物表面才能生長(zhǎng)，由于其自身特性，在消化這類(lèi)細(xì)胞的時(shí)候一般要借助蛋白水解酶。常用的兩種蛋白水解酶有兩種，分別是：胰蛋白酶和膠原酶。

1.胰蛋白酶（Trypsin）

胰蛋白酶是從牛、羊、豬的胰臟提取的一種絲氨酸蛋白水解酶。它能把多肽鏈中賴(lài)氨酸和精氨酸殘基中的羧基側(cè)切斷，不僅起消化酶的作用，而且還能限制分解糜蛋白酶原、羧肽酶原、磷脂酶原等其它酶的前體，起活化作用。

胰蛋白酶能直接作用在細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)細(xì)胞外的黏附蛋白及胞外基質(zhì)上，但如果作用時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，細(xì)胞膜上內(nèi)嵌的其他蛋白也會(huì)被水解，導(dǎo)致細(xì)胞膜受損；不同細(xì)胞適合的胰蛋白酶使用濃度及作用時(shí)間都各有不同。

2.膠原酶（Collagenase）

為一種膠原水解酶，大多由細(xì)菌提取而來(lái)；能辨識(shí)并剪切Pro-X-Gly-Pro勝肽序列，而此序列在胞外基質(zhì)主成分-膠原蛋白中出現(xiàn)的頻率比一般蛋白高很多，使得膠原酶能較專(zhuān)一的作用在胞外基質(zhì)上。

所以對(duì)細(xì)胞的傷害比胰蛋白酶小，且在鈣、鎂離子環(huán)境中仍有活性，可用BSS（如D-hanks或者PBS）或含血清的培養(yǎng)液配制。操作簡(jiǎn)便，但膠原酶價(jià)格相較于胰蛋白酶要高出許多，如果大量使用將增加實(shí)驗(yàn)成本。

以上是細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)貼壁細(xì)胞時(shí)經(jīng)常用到的兩種蛋白水解酶，兩種酶各有特點(diǎn)，都可以用來(lái)消化細(xì)胞，但在使用時(shí)要根據(jù)各自的特點(diǎn)，控制好消化時(shí)間，避免消化過(guò)度，影響細(xì)胞后期生長(zhǎng)。