血清是細胞培養(yǎng)過程中重要的營養(yǎng)物質(zhì),同時也對細胞起到一定的保護作用。有時候我們會發(fā)現(xiàn)血清瓶內(nèi)的血清出現(xiàn)一些沉淀物,那么這些沉淀物是什么,會不會對血清的質(zhì)量造成影響呢?
血清培養(yǎng)基瓶
血清沉淀的形成機理多種多樣,具體的機理不是十分明確,目前市面上多數(shù)品牌的血清產(chǎn)品都存在沉淀現(xiàn)象,血清瓶內(nèi)的沉淀主要是以下幾種物質(zhì):
1. 纖維蛋白
肉眼可見的較大物質(zhì)(可達 1-2 mm)。血清是在低溫條件下收集并迅速加工處理,導致一些纖維蛋白原仍存在于溶液中。雖然過濾去除了絕大部分的纖維蛋白,但解凍過程中,纖維蛋白原會再次轉(zhuǎn)化成纖維蛋白析出,形成沉淀。
2. 磷酸鈣
一種常見的沉淀物,表現(xiàn)為云狀。通過倒置顯微鏡觀察,會發(fā)現(xiàn)許多小黑點。由于布朗運動,這些黑點可自由移動,因此常備誤認為是微生物污染。少量的沉淀是血清解凍過程中的正常現(xiàn)象,過于澄清的血清并不代表更高的品質(zhì),也可能是加工過程中反復凍融盡可能的去除纖維蛋白原的結(jié)果。雖然血清中的沉淀很難預測和阻止,但合理正確的儲存和使用方法可以降低血清中沉淀的析出,同時也可采取簡單的方式去除沉淀物。
5層細胞工廠
除了以上兩種物質(zhì)外,血清中的其他成分也會形成沉淀,例如膽固醇形成的油脂滴和其他蛋白沉淀等。值得注意的是,血清瓶內(nèi)的沉淀物并不會影響血清的質(zhì)量,如果發(fā)現(xiàn)沉淀,可利用過濾或離心的方法進行去除即可。