細(xì)胞培養(yǎng)瓶是目前市場(chǎng)上應(yīng)用較多的一類細(xì)胞培養(yǎng)耗材，主要適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)。其中在小鼠成纖維細(xì)胞傳代中，也用到了這種耗材。
細(xì)胞培養(yǎng)瓶
小鼠成纖維細(xì)胞是一種用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的特殊細(xì)胞，成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛，細(xì)胞質(zhì)弱嗜堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng)，在一定條件下，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化。在收到成纖維細(xì)胞后需要在培養(yǎng)箱穩(wěn)定4小時(shí)左右再根據(jù)細(xì)胞密度、換液培養(yǎng)或傳代。傳代操作遵循以下步驟：
T175細(xì)胞培養(yǎng)瓶
1、吸出原細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加1~2 ml 0.25% EDTA的胰酶消化（注意把握消化時(shí)間，通常控制在1~2min）。
2、鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁運(yùn)動(dòng)時(shí)（不建議消化到細(xì)胞漂浮）去掉胰酶，加6~8ml 完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落、吹散。
3、取出部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶中，添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4、注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液，待細(xì)胞密度達(dá)到70-80%時(shí)重復(fù)傳代操作或者凍存。
細(xì)胞培養(yǎng)瓶在細(xì)胞傳代中的主要作用一是儲(chǔ)存細(xì)胞，二是為細(xì)胞提供貼壁的生長(zhǎng)環(huán)境。需要注意的是，如果收到細(xì)胞后，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂、漏液等情況，說(shuō)明細(xì)胞已經(jīng)受到污染，應(yīng)及時(shí)聯(lián)系供應(yīng)商。
