細(xì)胞培養(yǎng)板是一種多孔結(jié)構(gòu)的細(xì)胞培養(yǎng)耗材，主要應(yīng)用于小規(guī)模的細(xì)胞培養(yǎng)實驗或細(xì)胞的前期培養(yǎng)，也可以用于細(xì)胞克隆形成實驗。
細(xì)胞克隆形成實驗是用來檢測細(xì)胞增殖能力、侵襲性、對殺傷因素敏感性等項目的一種重要途徑，一般使用的耗材為6孔的細(xì)胞培養(yǎng)板。實驗可按照以下流程進(jìn)行操作：
1、將處于對數(shù)生長期的細(xì)胞胰酶消化后，完全培養(yǎng)基（基礎(chǔ)培養(yǎng)基+10%胎牛血清）重懸成細(xì)胞懸液，并計數(shù)；
2、細(xì)胞接種：于6孔細(xì)胞培養(yǎng)板中各實驗組接種400-1,000個細(xì)胞/孔（根據(jù)細(xì)胞生長情況確定，一般為700個細(xì)胞/孔）；
3、繼續(xù)培養(yǎng)到14天或絕大多數(shù)單個克隆中細(xì)胞數(shù)大于50為止，中途每隔3天進(jìn)行換液并觀察細(xì)胞狀態(tài)；
4、克隆完成后，在顯微鏡下對細(xì)胞進(jìn)行拍照，然后PBS洗滌1次，每孔加入1 mL 4%多聚甲醛固定30-60 min，PBS洗滌1次；
T225細(xì)胞培養(yǎng)瓶
5、每孔加入結(jié)晶紫染液1ml，染細(xì)胞10-20 min；
6、PBS 洗滌細(xì)胞數(shù)次，晾干，數(shù)碼相機(jī)拍照（分別對整個六孔板及每個孔進(jìn)行單獨(dú)拍照），進(jìn)行計數(shù)。
以上是細(xì)胞培養(yǎng)板在細(xì)胞克隆形成實驗中的應(yīng)用，在操作換液時需要緩慢加入培養(yǎng)基，防止吹起細(xì)胞，染色完成后務(wù)必將染液清洗干凈，避免影響實驗結(jié)果。
