培養(yǎng)基是細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),在利用細(xì)胞工廠進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)通常會(huì)涉及到換液操作,這樣可以清除細(xì)胞在生長(zhǎng)過(guò)程中產(chǎn)生的代謝廢物,補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基,使細(xì)胞更好的生長(zhǎng)與繁殖。
更換細(xì)胞工廠中的培養(yǎng)基首先要準(zhǔn)備好所需的器材:裝有75%醫(yī)用消毒酒精的酒精噴壺、PBS緩沖液、含血清培養(yǎng)基、液體轉(zhuǎn)移蓋、轉(zhuǎn)移管、廢液缸等。然后將所有器材放入超凈臺(tái),打開(kāi)紫外照射滅菌,如果培養(yǎng)的細(xì)胞對(duì)溫度比較敏感,可以將含血清的培養(yǎng)基瓶子放入37℃的水浴箱,使得培養(yǎng)基溫度在37℃,再轉(zhuǎn)移到超凈臺(tái)紫外滅菌,細(xì)胞培養(yǎng)間也需要紫外照射半小時(shí)左右。
紫外照射滅菌后,操作人員穿好滅菌服,戴好滅菌手套和口罩,取出細(xì)胞工廠,用酒精噴壺在表面噴灑75%酒精消毒,并將其轉(zhuǎn)移到超凈臺(tái),打開(kāi)蓋子,連接液體轉(zhuǎn)移蓋和轉(zhuǎn)移管,導(dǎo)出培養(yǎng)液。加入新鮮含血清培養(yǎng)基,注意一定不要從細(xì)胞貼壁面加入,應(yīng)從側(cè)壁加,動(dòng)作輕柔,以免沖落細(xì)胞。加好培養(yǎng)基后,蓋上蓋子,在耗材表面做標(biāo)記,注明換液時(shí)間、細(xì)胞種類(lèi)、操作人員等信息。在放入培養(yǎng)箱之前應(yīng)再次用酒精噴灑表面,整理操作臺(tái),用酒精擦拭超凈臺(tái)臺(tái)面,清理廢液和垃圾。
細(xì)胞對(duì)環(huán)境比較敏感,在對(duì)細(xì)胞工廠內(nèi)的培養(yǎng)基進(jìn)行換液操作時(shí),一定要注意無(wú)菌操作,避免因換液過(guò)程中感染各種細(xì)菌而影響細(xì)胞生長(zhǎng)。
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