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我們在使用細胞培養(yǎng)瓶進行細胞培養(yǎng)時最怕出現(xiàn)的情況可能就是細胞培養(yǎng)瓶的發(fā)現(xiàn)了污染了，今天富道細胞來跟大家分析一下細胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)細胞時的污染情況。

細胞房要保證干燥整潔，不然很容易染菌。真菌污染后，培養(yǎng)液清亮，培養(yǎng)瓶中出現(xiàn)絲狀物，細胞生長變慢，最后由于營養(yǎng)耗盡及毒性作用而使細胞脫落死亡。一旦發(fā)現(xiàn)真菌污染，可能導致整個培養(yǎng)箱中的細胞受到污染。需要徹底清理打掃培養(yǎng)箱、超凈臺、水浴鍋、細胞房等。

污染培養(yǎng)細胞的多為煙曲霉、黑曲霉、毛霉菌、孢子霉、白念珠菌、酵母菌等。霉菌污染后多數(shù)在培養(yǎng)液中形成白色或淺黃色漂浮物。一般肉眼可見，較易被發(fā)現(xiàn)，短期內(nèi)培養(yǎng)液多不混濁，倒置顯微鏡下可見于細胞之間縱橫交錯穿行的絲狀、管狀、及樹枝狀菌絲，并懸浮飄蕩在培養(yǎng)液中。很多菌絲在高倍鏡可見到有鏈狀排列的菌珠；念珠菌或酵母菌形態(tài)呈卵形，散在細胞周邊和細胞之間生長。

真菌污染多發(fā)生在傳代、換液、加樣等開放性操作中，所以實驗過程一定要注意。發(fā)生污染后，最好是廢棄。雖然抗菌的補救措施，但發(fā)生真菌污染后會對實驗結(jié)果產(chǎn)生影響，因為細胞培養(yǎng)瓶中出現(xiàn)污染一般是廢棄這瓶細胞。如果細胞價值較大，大家可以參照一些補救措施進行補救。

發(fā)生細菌污染時，培養(yǎng)液短時間內(nèi)顏色變黃，出現(xiàn)渾濁現(xiàn)象，顯微鏡下觀察時，培養(yǎng)液中有大量圓球狀顆粒漂浮，細胞變圓脫落死亡。細菌不像真菌有孢子，所以當一瓶細胞出現(xiàn)污染時，一般不會污染培養(yǎng)箱中其他細胞，將污染細胞廢棄就行。有時需要檢測菌源在哪里，即把培養(yǎng)液、水浴鍋等液體培養(yǎng)驗證，如果沒有必要進行驗證，將這些廢棄即可。

細胞房中水浴鍋是菌的一大孵育箱，勤換水、滅菌，拿進超凈臺的物品多噴酒精，杜絕可能染菌的情況。

支原體污染剛開始難以察覺，有專門的檢測試劑盒檢測。細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和支原體。發(fā)生污染后，最好將細胞廢棄。其主要的污染原因還是無菌操作技術(shù)不當、細胞房超凈臺環(huán)境不佳、血清污染和細胞污染等。嚴格無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染的最好方法。