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我們在使用細(xì)胞工廠等細(xì)胞培養(yǎng)耗材進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時，如果出現(xiàn)細(xì)胞污染的情況下，我們這段時間的努力可能都會白費。那我們?nèi)绾畏直孢@些污染的情況呢？今天富道細(xì)胞就跟大家分享一下。

細(xì)菌污染:肉眼可見細(xì)胞工廠底部有一層白色的薄膜，培養(yǎng)基渾濁變酸變黃呈云霧狀，鏡下觀察有自由行動的顆粒，細(xì)胞狀態(tài)差、基本死亡、看不到正常細(xì)胞形態(tài)。在高倍鏡下看到的有可能是一些細(xì)胞狀態(tài)不好分泌的雜質(zhì)，也有些是細(xì)胞凋亡后的碎片。通常凋亡細(xì)胞的裂解產(chǎn)物對正常細(xì)胞生長是不利的（比如溶酶體的釋放），所以有的話建議通過換液的方式去掉。這些小黑點會有布朗運動，看上去跟細(xì)菌一樣會動，區(qū)別在于細(xì)菌的形態(tài)是每個點都幾乎一樣，而且能看到某些黑點會向某一方向移動較長的距離（桿菌的話在高倍鏡下常有2根短桿狀的菌體黏在在相互扭動，有臭味），而碎片一般是在原地來回反復(fù)地振蕩，而且數(shù)量也不會增多。培養(yǎng)基是否渾濁和細(xì)菌密度有關(guān)，污染初期數(shù)量不多是不渾濁的。

霉菌污染:培養(yǎng)液清亮，肉眼看到培養(yǎng)瓶有團(tuán)塊的霉菌斑/菌落，可見絮狀漂浮物，顯微鏡下看到霉菌的菌絲，呈細(xì)束纖維狀或較為密集的孢子團(tuán)塊，呈細(xì)絲竹節(jié)管狀；污染初期pH穩(wěn)定，嚴(yán)重后迅速升高。

酵母菌污染:肉眼看到培養(yǎng)瓶顏色變得渾濁，顯微鏡下看到小的酵母顆粒。（注：真菌通常傾向于聚集生長，在培養(yǎng)體系內(nèi)形成“毛茸茸”的菌落，或絲狀菌體，但一般不出現(xiàn)培養(yǎng)基變酸等現(xiàn)象。）

白色念珠菌:污染肉眼看到培養(yǎng)瓶顏色變得渾濁，顯微鏡下看到一串一串的白色念珠菌。

支原體污染:細(xì)胞會長的慢，量少時培養(yǎng)基不會渾濁，對細(xì)胞影響較小，但支原體增殖速度快，逐漸影響細(xì)胞生長，細(xì)胞邊緣不清晰，培養(yǎng)基逐漸渾濁。支原體在沒做特殊處理的情況下無法用普通光鏡觀察到，只能買個支原體檢測試劑盒定期檢測一下/支原體抑制劑處理、日常預(yù)防。

真菌污染:細(xì)胞培養(yǎng)基清亮不變色，鏡下可見毛毛的白色絲狀漂浮物，慢慢的會長出很細(xì)的黑色絲狀物。真菌生長的比較慢，不像細(xì)菌那么容易被發(fā)現(xiàn)，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細(xì)胞就被污染了，也很難救活了。