我們?cè)谑褂?a href="http://www.shajihua.cn/pyfp.html" target="_blank">細(xì)胞培養(yǎng)瓶進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)過程中,細(xì)胞周圍包括細(xì)胞上有很多小黑點(diǎn),我們應(yīng)該采取什么措施呢?
首先我們知道細(xì)胞培養(yǎng)瓶中有很多小黑點(diǎn)一般可以判定為細(xì)胞碎片、雜質(zhì)、黑膠蟲污染,如果判定為細(xì)胞碎片或雜質(zhì)那我們可以根據(jù)懸浮培養(yǎng)和貼壁培養(yǎng)進(jìn)行已下處理方式:細(xì)胞培養(yǎng)瓶進(jìn)行懸浮細(xì)胞過程中出現(xiàn)雜質(zhì)的情況首先收集細(xì)胞上清慢速離心(500~600 rpm/min,5~6 min)并更換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
貼壁細(xì)胞出現(xiàn)這種情況的時(shí)候我們將細(xì)胞用 PBS 洗 2~3 遍,洗的時(shí)候,輕輕拍打培養(yǎng)瓶,讓貼壁不牢的碎片和顆粒脫落,再棄去 PBS,消化時(shí)先加低濃度的胰酶如 0.05% 胰酶消化 1 min 左右,讓細(xì)胞間隙中的顆粒和碎片脫落下來,去掉低濃度胰酶,然后正常消化細(xì)胞,將收集的細(xì)胞懸液慢速離心(500~600 rpm/min,5~6 min)并更換新的培養(yǎng)瓶,并可以嘗試適當(dāng)增加血清濃度進(jìn)行培養(yǎng)。
如果懷疑黑點(diǎn)是支原體污染,可進(jìn)行支原體檢測(cè),檢測(cè)陽性請(qǐng)及時(shí)將細(xì)胞處理后丟棄。比較珍貴的細(xì)胞,可以嘗試使用支原體清除劑(如泰樂菌素等)去除,并與其他細(xì)胞分開培養(yǎng)