在大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)中,細(xì)胞工廠是常用的一類耗材,主要用于貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。細(xì)胞生長需要各種營養(yǎng)物質(zhì),那么,具體都有哪些呢?
1、培養(yǎng)基
細(xì)胞培養(yǎng)基為細(xì)胞工廠中的細(xì)胞提供生長所需營養(yǎng)物質(zhì),包括碳水化合物、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素等。針對不同細(xì)胞的營養(yǎng)需求,有多種合成培養(yǎng)基可供選擇,如EBSS、Eagle、MEM、RPMll640、DMEM等。
2、其他添加成分
在各種合成培養(yǎng)基提供基礎(chǔ)營養(yǎng)物質(zhì)之外,還需根據(jù)不同細(xì)胞和不同的培養(yǎng)目的添加其他成分,如血清、因子等。
血清提供的是細(xì)胞外基質(zhì)、生長因子和轉(zhuǎn)鐵蛋白等重要物質(zhì),常用的是胎牛血清。要根據(jù)不同的細(xì)胞和不同的研究目的決定添加血清的比例。10%~20%的血清能維持細(xì)胞較快的生長增殖速度,稱為生長培養(yǎng)液;為維持細(xì)胞緩慢生長或不死,添加2%~5%的血清即可,稱為維持培養(yǎng)液。
谷氨酰胺是細(xì)胞生長重要的氮源,在細(xì)胞生長代謝過程中起重要作用,但由于谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定容易降解,4℃下放置7天即可分解約50%,故谷氨酰胺需在使用前添加。
綜合來看,細(xì)胞培養(yǎng)使用較多的是各種培養(yǎng)基和血清,但為了防止培養(yǎng)期間出現(xiàn)細(xì)胞污染,培養(yǎng)基中也會(huì)添加一定量的抗生素,如青霉素、鏈霉素、慶大霉素等。
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