血清滅活操作步驟如下:
1、選擇一個(gè)和培養(yǎng)基瓶一樣的瓶子作為對(duì)照瓶,把對(duì)照瓶?jī)?nèi)倒入和血清等體積的蒸餾水,作溫度的測(cè)量。
2、溫度的調(diào)節(jié)。在對(duì)照組的瓶子里插入兩個(gè)水銀溫度計(jì),放在水浴箱,在溫度計(jì)顯示56度時(shí)候,調(diào)節(jié)校準(zhǔn)水浴箱的溫度56度。3、將培養(yǎng)基瓶和對(duì)照瓶一起放入水浴箱,溫度調(diào)到56度,水浴半小時(shí),滅活之后分瓶裝,做無菌實(shí)驗(yàn),在-70—-20度下保存。
4、要觀察冰凍血清的顏色和透亮度,顏色偏紅或者顏色偏淺有沉淀表示血清質(zhì)量不好,因此要選擇質(zhì)量好的血清滅活。
5、血清的使用要避免多次的反復(fù)解凍,會(huì)增加血清被污染的概率和降低血清的質(zhì)量,一但反復(fù)解凍的血清出現(xiàn)沉淀那么表示血清不可用或者質(zhì)量極差。
6、為了保證實(shí)驗(yàn)的結(jié)果的穩(wěn)定,保證血清分瓶時(shí)候要搖勻,然后分瓶,盡量使用同一血清保證統(tǒng)一變量的原則。
以上是利用培養(yǎng)基瓶進(jìn)行血清滅活操作的具體步驟,但值得一提的是,在多數(shù)的細(xì)胞培養(yǎng)中,血清的熱滅活并不是必要的。很多場(chǎng)合下,熱滅活并不會(huì)改善細(xì)胞的生長(zhǎng),反而會(huì)破壞血清、增加沉淀狀況。除非文獻(xiàn)指出該細(xì)胞必須使用滅活血清,一般細(xì)胞培養(yǎng)可省略血清熱滅活步驟。
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