培養(yǎng)基是細(xì)胞培養(yǎng)過程中必需的營養(yǎng)物質(zhì),在利用細(xì)胞工廠進行細(xì)胞培養(yǎng)時通常會涉及到換液操作,這樣可以清除細(xì)胞在生長過程中產(chǎn)生的代謝廢物,補充新鮮的培養(yǎng)基,使細(xì)胞更好的生長與繁殖。
更換細(xì)胞工廠中的培養(yǎng)基首先要準(zhǔn)備好所需的器材:裝有75%醫(yī)用消毒酒精的酒精噴壺、PBS緩沖液、含血清培養(yǎng)基、液體轉(zhuǎn)移蓋、轉(zhuǎn)移管、廢液缸等。然后將所有器材放入超凈臺,打開紫外照射滅菌,如果培養(yǎng)的細(xì)胞對溫度比較敏感,可以將含血清的培養(yǎng)基瓶子放入37℃的水浴箱,使得培養(yǎng)基溫度在37℃,再轉(zhuǎn)移到超凈臺紫外滅菌,細(xì)胞培養(yǎng)間也需要紫外照射半小時左右。
紫外照射滅菌后,操作人員穿好滅菌服,戴好滅菌手套和口罩,取出細(xì)胞工廠,用酒精噴壺在表面噴灑75%酒精消毒,并將其轉(zhuǎn)移到超凈臺,打開蓋子,連接液體轉(zhuǎn)移蓋和轉(zhuǎn)移管,導(dǎo)出培養(yǎng)液。加入新鮮含血清培養(yǎng)基,注意一定不要從細(xì)胞貼壁面加入,應(yīng)從側(cè)壁加,動作輕柔,以免沖落細(xì)胞。
加好培養(yǎng)基后,蓋上蓋子,在耗材表面做標(biāo)記,注明換液時間、細(xì)胞種類、操作人員等信息。在放入培養(yǎng)箱之前應(yīng)再次用酒精噴灑表面,整理操作臺,用酒精擦拭超凈臺臺面,清理廢液和垃圾。
細(xì)胞對環(huán)境比較敏感,在對細(xì)胞工廠內(nèi)的培養(yǎng)基進行換液操作時,一定要注意無菌操作,避免因換液過程中感染各種細(xì)菌而影響細(xì)胞生長。
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