在細胞的大規(guī)模培養(yǎng)中,細胞工廠是常用的一種培養(yǎng)容器。不同于普通的培養(yǎng)耗材,它采用多層結構設計,具有培養(yǎng)面積大、占用空間少、可結合自動化設備使用等優(yōu)勢。如此特殊的細胞培養(yǎng)工具,應該如何操作呢?
1、用傾倒的方式加入需要量的細胞懸液到細胞工廠中,建議每層加入的體積為200ML。
2、加完細胞懸液后保持側立,有加液口的一側背向自己,平衡一段時間以使液體平均分配到各層。
3、逆時針旋轉90度,使加液口一面朝上,靜置一段時間,培養(yǎng)液便會自動平均分配到每一層中。
4、雙手握住進液口的一面,慢慢將細胞工廠放倒,變?yōu)樗椒胖谩?
5、采用十字交叉法混合懸液,然后輕輕地將細胞工廠移至細胞培養(yǎng)箱中孵育培養(yǎng)。
6、培養(yǎng)結束后直接將培養(yǎng)液倒入收集容器。
7、先用PBS清洗一遍(遵循步驟2-4),加入細胞消化液(建議每層加入的消化液≥15ML/層),重復步驟2-4,靜置2分鐘(具體視細胞消化情況而定)。
8、加入適量消化終止液混勻,把細胞懸液倒入收集容器。
以上是細胞工廠的操作步驟,細胞培養(yǎng)是一項精細化的工作,在操作中要嚴格按照規(guī)定步驟操作,避免因為操作不當損傷細胞,影響后期實驗效果。
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