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消化細(xì)胞是培養(yǎng)細(xì)胞過程中的一項(xiàng)基本操作，而胰蛋白酶則是消化細(xì)胞過程中用到的一種消化液。今天我們就詳細(xì)講一下胰蛋白酶。

胰蛋白酶Trypsin (Parenzyme) 為蛋白酶的一種，EC 3.4.4.4，是從牛、羊、豬的胰臟提取的一種絲氨酸蛋白水解酶。在脊椎動(dòng)物中，作為消化酶而起作用。胰蛋白酶的作用是使細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)細(xì)胞間的蛋白質(zhì)水解從而使細(xì)胞離散。不同的組織或者細(xì)胞對胰酶的作用反應(yīng)不一樣。

胰酶分散細(xì)胞的活性還與其濃度、溫度和作用時(shí)間有關(guān)，在 pH 為 8.0 、溫度為 37℃ 時(shí)，胰酶溶液的作用能力最強(qiáng)。使用胰酶時(shí)，應(yīng)把握好濃度、溫度和時(shí)間，以免消化過度造成細(xì)胞損傷。因 Ca2+ 、 Mg2+ 和血清、蛋白質(zhì)可降低胰酶的活性，所以配制胰酶溶液時(shí)應(yīng)選用不含 Ca2+ 、 Mg2+ 的 BSS ，如： D-Hanks 液。終止消化時(shí)，可用含有血清培養(yǎng)液或者胰酶抑制劑終止胰酶對細(xì)胞的作用。

在使用胰蛋白酶消化細(xì)胞的過程中藥注意避免消化液被細(xì)菌污染，一般消化時(shí)間約為1-3分鐘，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶瓶底由半透明轉(zhuǎn)為透明、點(diǎn)狀時(shí)，棄去細(xì)胞消化液，或看見培養(yǎng)瓶壁呈白茫狀即可。