在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),細(xì)胞耗材是一種不可或缺的工具,并且一些耗材不止用于培養(yǎng)細(xì)胞,還是一種儲存容器。三角細(xì)胞搖瓶就是一種多功能性的耗材,它也用于培養(yǎng)基的制備,其制備流程如下:
1、配料:在容器中加入少量水,按照配方稱取各種藥品,加足所需水量(一藥一勺,取藥后立即蓋上瓶蓋)。
2、淀粉溶解:少量冷水調(diào)成糊狀,加熱溶解,特別是加有瓊脂的培養(yǎng)基,一定要煮沸,瓊脂的熔解溫度95-97℃ ,且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。
3、調(diào)PH:用1N的鹽酸或1N的 NaOH把培養(yǎng)基調(diào)節(jié)到所要求的值。
4、過濾:濾紙或棉花進(jìn)行過濾。
5、分裝:一般培養(yǎng)基放在三角細(xì)胞搖瓶中滅菌使用。
6、滅菌:按配方上要求的溫度、壓力進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高,營養(yǎng)成分會被破壞,培養(yǎng)基中的糖、氨基酸會使培養(yǎng)基的顏色變深。
7、擺斜面:滅菌后需要擺斜面的試管要趁熱斜著擺放,使其凝固成為一個(gè)斜面,約占試管長度的1/2。
8、貯存:培養(yǎng)基在30℃下放置一天,無污染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用。
培養(yǎng)基為細(xì)胞生長提供各種營養(yǎng)物質(zhì),不同細(xì)胞對培養(yǎng)基的成分要求也不同。儲存在三角細(xì)胞搖瓶中的培養(yǎng)基要注意時(shí)間及儲存環(huán)境的要求,避免污染。