細(xì)胞搖瓶是一種三角形的細(xì)胞培養(yǎng)容器,主要用于各種懸浮細(xì)胞、真菌的培養(yǎng)。在培養(yǎng)細(xì)胞的過程中,換液是一項(xiàng)基本的操作,但操作不當(dāng)也會(huì)影響細(xì)胞的生長(zhǎng)。那么,我們?cè)撊绾芜M(jìn)行換液呢?
通過換液可以去除掉細(xì)胞在生長(zhǎng)國(guó)產(chǎn)中產(chǎn)生的代謝廢物,補(bǔ)充新鮮的含血清培養(yǎng)基,為細(xì)胞的生長(zhǎng)繼續(xù)提供充足的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。換液之前我們首先要準(zhǔn)備好相應(yīng)的器材:裝有75%醫(yī)用消毒酒精的酒精噴壺、PBS緩沖液、含血清培養(yǎng)基、巴氏吸管、移液器、廢液缸等。在使用前需要將器材放入超凈臺(tái)進(jìn)行滅菌,防止污染細(xì)胞。
滅菌完畢后,做好個(gè)人防護(hù)(滅菌服、滅菌手套、口罩),從培養(yǎng)箱取出細(xì)胞搖瓶,用酒精噴壺在瓶子表面噴灑酒精消毒,轉(zhuǎn)移到超凈臺(tái),打開蓋子,輕輕洗出舊的培養(yǎng)液,可用移液器加入新鮮含血清培養(yǎng)基,動(dòng)作要輕柔。加好培養(yǎng)基后,蓋上蓋子,做好標(biāo)記,注明換液時(shí)間、細(xì)胞種類、操作人員等信息。
放入培養(yǎng)箱之前再次酒精消毒,整理操作臺(tái),用酒精擦拭超凈臺(tái)臺(tái)面,清理廢液和垃圾。
以上是細(xì)胞搖瓶的換液操作,需要注意,細(xì)胞換液要把控好時(shí)機(jī),懸浮細(xì)胞長(zhǎng)到達(dá)培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)成份用的差不多時(shí),半量換液,切勿頻繁換液。