細胞傳代培養(yǎng)是指將培養(yǎng)物分割成小的部分,重新接種到另外的培養(yǎng)器皿(瓶)內(nèi),再進行培養(yǎng)的過程。高效細胞搖瓶是懸浮細胞培養(yǎng)常用的耗材,那么怎樣利用高效搖瓶對細胞進行傳代呢?
從懸浮細胞的特性上來看,這種細胞是不貼壁的,所以不需要酶的作用就可以使細胞從高效搖瓶表面脫離。一般實驗室中常用直接傳代法和離心傳代法來進行懸浮細胞的傳代。當觀察到細胞長滿至 80%~90%(細胞懸液變黃)的時候,細胞就可以進行傳代操作了。
從顯微鏡下觀察,如果細胞生長狀態(tài)良好時,可以選擇直接傳代法。將高效搖瓶中的培養(yǎng)基按比例分裝到新的培養(yǎng)瓶中,補加新鮮培養(yǎng)基,隔天觀察細胞密度確定是否需要補液。
如果細胞狀態(tài)較差時則需要使用離心傳代法,首先將細胞懸液轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),1000rpm 離心 5 min,然后棄去上層清液,輕輕地將細胞沉淀彈散,使用新鮮的培養(yǎng)基重懸細胞,最后用吸管吸取適量細胞懸液,裝入新的培養(yǎng)瓶,再加入適量的新鮮培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)。
利用高效搖瓶進行懸浮細胞的傳代主要有直接傳代法和離心傳代法兩種方式,具體選擇哪種方式進行傳代要根據(jù)細胞的生長狀態(tài)來確定。
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