在利用細(xì)胞搖瓶培養(yǎng)懸浮細(xì)胞的過(guò)程中,我們經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)死細(xì)胞和細(xì)胞碎片,細(xì)胞死亡后由于細(xì)胞結(jié)構(gòu)的破壞會(huì)釋放出損傷分子,影響活細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)。那么我們?nèi)绾稳コ兰?xì)胞呢?目前常用的有以下幾種方法:
1.磁珠分選:磁珠分選是一種在磁場(chǎng)下,通過(guò)磁珠標(biāo)記細(xì)胞以達(dá)到分選目的的技術(shù)。它通過(guò)磁場(chǎng)將細(xì)胞搖瓶?jī)?nèi)結(jié)合了磁珠與未結(jié)合磁珠的細(xì)胞分離,篩選出死細(xì)胞。
2.密度梯度離心:用一定的介質(zhì)在離心管內(nèi)形成一連續(xù)或不連續(xù)的密度梯度,將細(xì)胞混懸液或勻漿置于介質(zhì)的頂部,通過(guò)重力或離心力場(chǎng)的作用使細(xì)胞分層、分離。此離心法的關(guān)鍵是選擇合適的離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間。
3.流式分選:是比較傳統(tǒng)的一種分選方法,在分選一些復(fù)雜且稀有的細(xì)胞類(lèi)型、需要基于細(xì)胞內(nèi)標(biāo)記或基于細(xì)胞表面標(biāo)記物表達(dá)水平進(jìn)行分選時(shí),必須使用流式分選,但這種方式對(duì)儀器和操作人員技能的要求較高。