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細(xì)胞培養(yǎng)瓶是細(xì)胞初級(jí)培養(yǎng)階段經(jīng)常會(huì)用到的一種耗材，它多用于貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。在細(xì)胞生長(zhǎng)到一定程度后，就需要對(duì)瓶?jī)?nèi)的細(xì)胞進(jìn)行傳代，具體如何操作呢？

T75細(xì)胞培養(yǎng)瓶

1、去掉原來(lái)細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，加入3-4 ml PBS洗1-2次；

PETG血清培養(yǎng)基瓶

2、加入trypsin-EDTA溶液(1ml/25cm2,2ml/75cm2)，37℃作用數(shù)分鐘，于倒立顯微鏡下觀察，當(dāng)細(xì)胞將要分離而呈現(xiàn)圓粒狀時(shí)，吸掉trypsin-EDTA溶液。(若不移去trypsin-EDTA，則在trypsin-EDTA作用后，加入適量含血清之新鮮培養(yǎng)基終止trypsin作用，離心后再吸掉上清液。

T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

3、輕拍拼字使細(xì)胞自瓶壁脫落，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊，混和均勻后，依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。