細(xì)胞搖瓶是一種經(jīng)濟(jì)實(shí)惠的細(xì)胞培養(yǎng)工具,主要用于對氧氣要求比較高的細(xì)胞系,如在懸浮液中培養(yǎng)的細(xì)菌、真菌、動植物細(xì)胞等。靈芝的液體發(fā)酵與菌種制作中也用到了這種工具,在培養(yǎng)時對氧氣、接種量也有一定的要求。
深層發(fā)酵培養(yǎng)時,菌絲生長快,所以對氧的需要量非常高,在開始11~18小時內(nèi),若發(fā)酵液中氧含量不能滿足靈芝菌絲生長的需要,將會嚴(yán)重影響細(xì)胞搖瓶中菌絲的生長。但在發(fā)酵初期,發(fā)酵液中菌絲量少,所以需氧量也可少些,菌絲進(jìn)入旺盛生長期時,需要的氧量就增加,這時發(fā)酵罐通氣量應(yīng)控制到約0.51(v/v min),即每1m3的發(fā)酵液中,每分鐘應(yīng)通入無菌純凈空氣約0.51m3。發(fā)酵后期,菌絲衰老,代謝能力下降,呼吸量也降低,所以通氣量可適當(dāng)減少。通氣發(fā)酵培養(yǎng)時,要不斷的攪拌,攪拌能使氧氣均勻的分布在發(fā)酵液中,通過攪拌,發(fā)酵液中可溶解更多的氧氣,菌絲分布也均勻,但攪拌速度不能太快,攪拌速度太快菌絲容易產(chǎn)生損傷。
液體深層發(fā)酵培養(yǎng)時,菌絲生長速度與接種量有關(guān),接種量多,菌絲生長快,雜菌感染率低,但菌絲老化快,接種量少,菌絲生長慢,菌絲老化也慢,但若在較長時間中,發(fā)酵液中沒有足夠的靈芝菌絲時,抗菌性就會降低,所以接種量過少時,容易感染雜菌。