細(xì)胞搖瓶是一款經(jīng)濟(jì)實惠的細(xì)胞培養(yǎng)耗材,主要用于對氧氣要求比較高的細(xì)胞系,也可以用在懸浮液中培養(yǎng)細(xì)菌、真菌和動植物細(xì)胞,是液體菌種常用的耗材。在使用搖床進(jìn)行發(fā)酵實驗的過程中經(jīng)常遇到這種問題,在轉(zhuǎn)速一定的情況下發(fā)酵前期是結(jié)菌球的,但是發(fā)酵后期菌球散了,這是什么原因造成的呢?
利用細(xì)胞搖瓶進(jìn)行細(xì)菌或真菌的培養(yǎng)是現(xiàn)階段常用的培養(yǎng)方式,在實驗過程中,后期菌球分散情況一般考慮以下兩種原因:
1、一些菌種發(fā)酵時間長了以后就會出現(xiàn)自溶現(xiàn)象,在培養(yǎng)前要清除自己選用的菌種是不是長期發(fā)酵會自溶的菌種。
2、另一方面也可能是菌種退化,退化菌種的菌絲在培養(yǎng)基上表現(xiàn)生長很慢,長勢弱,稀疏,伸入培養(yǎng)基深層無力,分泌色素差;出耳慢,中途停止發(fā)育,子實體形態(tài)不一致,大小、厚薄不均,顏色改變,產(chǎn)量低。如果是這種情況需要重新活化后再繼續(xù)實驗,可在培養(yǎng)基中添加1%—3%的酵母自溶膏和0.15%的檸檬酸鈉、葡萄糖與酵母浸膏,或向每100 mL培養(yǎng)基中添加2.5mg脯氨酸或0.09%的谷胱甘肽增強(qiáng)菌的活性。
細(xì)胞搖瓶發(fā)酵后期菌絲球分散主要考慮以上兩種原因,找到原因后做出針對性舉措,才能保證實驗的順利進(jìn)行。