細(xì)菌污染是利用細(xì)胞工廠培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)常見的一種污染源,包括大腸桿菌,白色葡萄球菌,假單孢菌等,如果細(xì)胞被細(xì)菌污染后應(yīng)該如何處理呢?
判斷污染:細(xì)菌污染不同于其他污染源,一旦細(xì)胞工廠內(nèi)的細(xì)胞發(fā)生污染很容易被發(fā)現(xiàn),多數(shù)情況下培養(yǎng)液短時(shí)間內(nèi)變黃,表明有大量酸性物質(zhì)產(chǎn)生,出現(xiàn)明顯渾濁現(xiàn)象;有時(shí)靜置的培養(yǎng)液起初不混,但稍加震蕩,就有許多混濁物漂起。倒置顯微鏡下觀察,可見培養(yǎng)液中有大量圓球狀顆粒物漂浮,有時(shí)在細(xì)胞表面及周圍有大量細(xì)菌存在,細(xì)胞停止生長并有中毒表現(xiàn)。必要時(shí)可取少量培養(yǎng)液涂片染色檢查以明確細(xì)菌種類;有的培養(yǎng)液改變不明顯而有疑似污染,亦可向肉湯培養(yǎng)基內(nèi)地入少量培養(yǎng)液,37 度培養(yǎng)以檢測(cè)。
處理污染:發(fā)現(xiàn)細(xì)菌污染后可以用抗生素常用量的5-10倍進(jìn)行沖擊療法,用藥24-48小時(shí)候再換常規(guī)培養(yǎng)液,此方法在早期污染時(shí)有效。如果發(fā)現(xiàn)較晚,污染嚴(yán)重,建議棄用細(xì)胞。
血清培養(yǎng)基瓶500ml
細(xì)菌污染的關(guān)鍵在于預(yù)防,在細(xì)胞工廠的培養(yǎng)液中加用抗菌素可預(yù)防和排除個(gè)別一般少量的細(xì)菌污染。如果進(jìn)行多種細(xì)胞培養(yǎng),器具要嚴(yán)格分開,防止交叉細(xì)胞感染。