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霉菌污染是科研人員在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中非常擔(dān)心的情況之一，常常導(dǎo)致項(xiàng)目延期、損失稀缺的細(xì)胞等后果。那么應(yīng)該如何處理細(xì)胞工廠中的霉菌污染，降低損失呢？

40層細(xì)胞工廠

判斷污染：真菌的種類非常多，對細(xì)胞造成污染的多是曲霉菌、白色念珠菌、酵母菌、黑霉菌、孢子菌等。霉菌污染后往往會(huì)在培養(yǎng)液中形成淡黃色或是白色的漂浮物，肉眼可見，很容易被發(fā)現(xiàn)，短期內(nèi)培養(yǎng)液一般不變混濁。倒置顯微鏡下可以看見細(xì)胞之間有縱橫交錯(cuò)穿行的絲狀，樹枝狀或管狀菌絲，并漂浮在培養(yǎng)液中。很多菌絲在高倍鏡下可以看見鏈狀排列的菌株。念珠菌及酵母菌菌株呈卵圓形，散在細(xì)胞上及細(xì)胞周邊生長。有時(shí)通過顯微鏡可能會(huì)發(fā)現(xiàn)在培養(yǎng)瓶外壁生長的菌絲，較易誤認(rèn)為污染。發(fā)現(xiàn)瓶外的菌絲后應(yīng)及時(shí)用酒精擦拭干凈。 

10層細(xì)胞工廠

處理污染：首先，需要確定細(xì)胞工廠中的污染物是否是霉菌污染，如確認(rèn)是霉菌污染，盡快把污染細(xì)胞與其它細(xì)胞系隔離開，同時(shí)需要對實(shí)驗(yàn)過程中所用的器材和試劑做處理。一般來說，高濃度的抗生素和抗霉菌素都可能對細(xì)胞或細(xì)胞系有毒性作用，因此，通過劑量反應(yīng)實(shí)驗(yàn)確定抗生素和抗霉菌素產(chǎn)生毒性的劑量水平，在使用抗生素如兩性霉素 B 和抗霉菌素如泰樂菌素時(shí)尤為重要。

T75細(xì)胞培養(yǎng)瓶

綜上所述，處理細(xì)胞工廠中的霉菌污染可以按照以上方法進(jìn)行。此外，在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，要嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作，減少各種污染。