細(xì)胞工廠適用于大規(guī)格工業(yè)批量生產(chǎn),主要培養(yǎng)細(xì)胞也為貼壁培養(yǎng),其培養(yǎng)細(xì)胞為甲肝疫苗、乙肝疫苗、水痘疫苗等主要生產(chǎn)途徑,但是我們在使用細(xì)胞工廠培養(yǎng)細(xì)胞時經(jīng)常會發(fā)現(xiàn)細(xì)胞工廠內(nèi)細(xì)胞不貼壁,那我們應(yīng)該怎么做呢?
首先,細(xì)胞工廠培養(yǎng)細(xì)胞時如果出現(xiàn)不貼壁現(xiàn)象,其原因是多方面的,具體可以從以下幾個方面分析解決:
胰蛋白酶消化過度:胰蛋白酶是幫助細(xì)胞進(jìn)行消化的,如果消化過度會對細(xì)胞的活性將產(chǎn)生較大的損傷,并有細(xì)胞漂浮。可以通過縮短消化時間或降低胰蛋白酶濃度的辦法進(jìn)行控制。
支原體污染:細(xì)胞對環(huán)境比較敏感,如果操作人員不注意衛(wèi)生、或工作環(huán)境及實驗器材出現(xiàn)污染都會導(dǎo)致細(xì)胞間的交叉污染,出現(xiàn)不貼壁現(xiàn)象。如果發(fā)現(xiàn)支原體污染,及時丟棄培養(yǎng)物。
細(xì)胞老化:細(xì)胞老化(cellular aging)是細(xì)胞隨生物體年齡增長而發(fā)生退行性變化的總和,如果傳代前細(xì)胞已匯合就會導(dǎo)致其失去貼附性。可以復(fù)蘇新的保種細(xì)胞,重新進(jìn)行培養(yǎng)。
此外,如果接種細(xì)胞時的起始濃度太低或太高也會影響細(xì)胞的貼壁性能,調(diào)節(jié)好合適的接種細(xì)胞濃度可以解決這一問題。在使用細(xì)胞工廠前,操作人員要做好自身及環(huán)境的消毒工作,避免因各種污染影響細(xì)胞培養(yǎng)進(jìn)程。